Produzione di lacrime di siero per occhi secchi

Questo video didattico descrive la produzione di lacrime sieriche autologhe per i pazienti con grave malattia dell'occhio secco (DED) che non rispondono ai trattamenti convenzionali. Derivate dal sangue del paziente stesso, le lacrime di siero offrono componenti biologici assenti nei sostituti artificiali, come i fattori di crescita e le immunoglobuline. Il processo prevede la raccolta del sangue, la coagulazione, la centrifugazione, la diluizione con soluzione salina bilanciata e la conservazione sterile. Sebbene la preparazione richieda attrezzature specializzate e presenti sfide logistiche, le lacrime di siero autologhe forniscono un'opzione personalizzata e biologicamente compatibile per la DED refrattaria. Il video guida i medici attraverso ogni fase della produzione, supportando l'adozione informata di questo approccio terapeutico avanzato nella pratica clinica.

La malattia dell'occhio secco (DED) è caratterizzata da instabilità del film lacrimale e infiammazione della superficie oculare che possono avere un impatto significativo sulla qualità della vita. ^1,2 Mentre le terapie convenzionali come le lacrime artificiali, i tappi puntali e i farmaci antinfiammatori sono frequentemente impiegati, un sottogruppo di pazienti con gravi sintomi di DED non riesce a rispondere adeguatamente a questi interventi. Per questi casi resistenti al trattamento, le lacerazioni sieriche autologhe sono state studiate come approccio terapeutico alternativo. ^3,4

Le lacrime sieriche possono essere utilizzate in pazienti con malattia refrattaria della superficie oculare in cui la terapia convenzionale è insufficiente. I candidati appropriati includono quelli con grave carenza di occhio secco acquoso che non risponde alla massima lubrificazione e terapia antinfiammatoria, nonché pazienti con epitelio lento o non cicatrizzante o rottura ricorrente dopo chirurgia della superficie oculare (ad esempio, trapianto limbare, cheratoprotesi, cheratoplastica, innesto di cerotto di Tenone o uso della membrana amniotica). Sono anche considerati nei difetti epiteliali corneali cronici non cicatrizzanti associati a condizioni come la malattia del trapianto contro l'ospite, le ustioni della superficie post-oculare, la congiuntivite cicatrizzante cronica, l'esposizione o la cheratopatia neurotrofica e la cheratopatia da radiazioni. Le lacerazioni sieriche possono essere utilizzate anche in casi selezionati di dolore oculare neuropatico, riflettendo il loro potenziale più ampio nei pazienti con compromissione epiteliale o sintomatica persistente nonostante le cure standard. ⁵

La base biologica per l'impiego del siero nel trattamento della superficie oculare deriva dalla sua somiglianza compositiva con le lacrime naturali. Le lacrime umane comprendono oltre 3.000 componenti diversi, tra cui fattori di crescita, vitamine e immunoglobuline che non possono essere replicate nei lubrificanti prodotti commercialmente. ⁶

Questo video mostra la produzione di lacrime di siero autologhe, che viene avviata con la raccolta del sangue dal paziente. In genere, vengono prelevate quattro fiale di sangue per garantire che possa essere prelevata una quantità sufficiente di siero per la preparazione di un'adeguata scorta di lacrime. Dopo la raccolta, il sangue viene lasciato coagulare a temperatura ambiente.

Dopo un periodo di coagulazione di 20 minuti, i campioni di sangue vengono centrifugati a 350 rotazioni al minuto (RPM) per altri 20 minuti. Il processo di centrifugazione facilita la separazione del siero dai componenti cellulari del sangue.

Una volta completata la centrifugazione, il siero separato viene estratto con cura e trasferito in fiale sterili che contengono una soluzione salina bilanciata (BSS). Questa BSS è una soluzione fisiologica sterile che comprende cloruro di sodio, cloruro di potassio, cloruro di calcio, acetato di sodio e citrato di sodio disidratato. Per raggiungere la concentrazione tipicamente desiderata di almeno il 30% di siero, circa 1 mL di siero viene combinato con 2 mL di BSS in ciascuna fiala.

I colliri sierici autologhi sono stati studiati in concentrazioni comprese tra il 20% e il 100%, con la maggior parte dell'uso clinico tra il 20% e il 50%; il primo rapporto utilizzava una diluizione del 33% e uno studio ha trovato il siero del 100% più efficace del 50% nei pazienti con sindrome di Sjögren, anche se non per altre eziologie dell'occhio secco. Sebbene non esista un consenso universale sulla diluizione ottimale, preferiamo concentrazioni di almeno il 30% per garantire un'attività biologica sufficiente. Gli effetti avversi riportati sono rari, per lo più limitati alla crescita microbica in flaconi conservati, senza sequele cliniche negli studi sull'occhio secco, sebbene un caso di cheratite microbica sia stato documentato in uno studio sul difetto epiteliale persistente. Nel complesso, le prove supportano la sicurezza e l'efficacia, ma l'eterogeneità del protocollo impedisce raccomandazioni definitive su una concentrazione ottimale esatta. ⁷

Le lacrime di siero preparate vengono conservate congelate per mantenere l'efficacia e prevenire la contaminazione batterica. Quando necessario per l'uso, una fiala viene trasferita in frigorifero per un uso settimanale, mentre la scorta rimanente viene mantenuta congelata. Questo approccio è progettato per preservare le proprietà terapeutiche del siero per un periodo prolungato, fornendo in genere una fornitura di tre mesi per il paziente.

Le lacerazioni sieriche autologhe sono prese in considerazione principalmente per i pazienti con DED grave che non è migliorata con i trattamenti convenzionali. Le prove provenienti da studi randomizzati riassunte in una revisione Cochrane suggeriscono che le lacerazioni sieriche possono fornire un sollievo dai sintomi a breve termine (circa due settimane) superiore alle lacrime artificiali, ma i dati oltre le quattro settimane e sulle misure cliniche oggettive rimangono inconcludenti, quindi il beneficio a lungo termine è incerto. ³

In pratica, i pazienti vengono in genere istruiti a instillare le gocce da quattro a sei volte al giorno, con un dosaggio personalizzato in base alla gravità dei sintomi e alla risposta. Ogni fiala viene generalmente utilizzata per una settimana e sono necessari rigorosi protocolli di congelamento/refrigerazione per ridurre al minimo il rischio di contaminazione o degradazione.

Le lacrime di siero autologhe rimangono sterili e biochimicamente stabili se conservate a -20 °C per un massimo di 6 mesi, favorendo prelievi di sangue meno frequenti e una logistica più efficiente. In pratica, ciò consente di trasformare una singola donazione in una fornitura a lungo termine se vengono seguiti adeguati protocolli di preparazione asettica e congelamento. ⁸ Tuttavia, durante la distribuzione ai pazienti, di solito limitiamo la distribuzione a 12 settimane di fornitura per mitigare il rischio di manipolazione e garantire la sicurezza del paziente durante l'uso e la conservazione.

Sebbene la terapia lacrimale con siero offra potenziali vantaggi, presenta diversi vincoli: la necessità di raccolta del sangue, una preparazione complessa che richiede attrezzature specializzate e personale qualificato, una spesa maggiore rispetto ai sostituti lacrimali standard, condizioni di conservazione difficili e composizione incoerente tra diverse preparazioni e individui. Sono necessarie ulteriori ricerche per standardizzare i protocolli di preparazione, ottimizzare i rapporti di concentrazione e sviluppare metodi di conservazione migliorati. 

Esistono alcune alternative pratiche per i medici che potrebbero non avere accesso ad apparecchiature specializzate per la composizione o a personale qualificato. In tali contesti, il siero allogenico collirio preparato dalle banche del sangue ospedaliere può fungere da valido sostituto, garantendo sterilità e standardizzazione. Per i medici che non hanno accesso a terapie a base di siero, l'ottimizzazione dei trattamenti convenzionali (lacrime artificiali, occlusione puntiforme, lenti sclerali o farmaci antinfiammatori topici) rimane essenziale, organizzando il rinvio a centri terziari in grado di preparare lacrime da siero. Questo approccio a più livelli consente ai pazienti di ricevere cure efficaci anche in ambienti con risorse limitate, riducendo al minimo i ritardi nell'inizio del trattamento per la malattia della superficie oculare grave o refrattaria.

Questo video didattico fornisce le conoscenze essenziali per i professionisti della cura degli occhi che trattano la DED resistente. Dimostrando la produzione graduale di lacrime di siero autologo, consente ai medici di implementare questa terapia specializzata nei casi appropriati.

Nulla da rivelare.